Murex HIV Ag/Ab Combination

by 15_kimkim178 27.07.19 18:46

[Only admins are allowed to see this link][You must be registered and logged in to see this image.]
Mục đích sử dụng
Xét nghiệm miễn dịch liên kết Enzym phát hiện kháng thể đối với vius HIV tuýp 1 và anti-HIV tuýp 2.
I.Thông tin thuốc thử
Tất cả lọ thuốc thử được lưu giữ ở nhiệt độ 2-8°C, không sử dụng thuốc thử hết hạn.
1. Khay giếng-Coated wells.
Các giếng được gắn kháng thể đơn dòng và kháng nguyên đối với HIV. Giữ khay giếng ở nhiệt độ phòng (18 -30°C) trước khi sử dụng.
2. Lọ pha loãng mẫu -Sample Diluent
01 lọ pha loãng mẫu có thể tích 18 ml chứa dung dịch đệm màu xanh lục/nâu. bao gồm protein của bò, chất làm sạch, saponin.
3. Chứng âm-Negative Control
02 lọ chứa 2.5ml huyết thanh bình thường của người.
4. Chứng dương-Anti-HIV-1 Positive Control
01 lọ chứa 1.7 ml huyết thanh khử họat tính của người. Huyết thanh với dung dịch đệm chứa protein từ bò.
5. Chứng dương-Anti-HIV-2 Positive Control
01 lọ chứa 1.7 ml huyết thanh khử họat tính của người. Huyết thanh với dung dịch đệm chứa protein từ bò.
6. Chứng dương-HIV-1 p24 Positive Control
01 lọ chứa 1.7 ml kháng nguyên tái tổ hợp p24. Huyết thanh với dung dịch đệm chứa protein từ bò.
7. Chất cộng hợp-Conjugate
01 lọ chứa 1.1 ml   chất đông khô chứa kháng nguyên và kháng thể đơn dòng đối với HIV của horseradish-peroxidase.
8.Dung dịch hòan nguyên Conjugate Diluent
01 lọ chứa 22 ml dung dịch đệm màu vàng dùng để hoàn nguyên chất đông khô Conjugate. Sau khi hòan nguyên, dung dịch Conjugate được dùng trong 4 tuần nếu lưu giữ ở nhiệt độ 2-8°C.
9. Dung dịch pha loãng chất lên màu-Substrate Diluent
01 lọ chứa 35 ml dung dịch tri-sodium citrate và hydrogen peroxide.
10. Dung dịch lên màu đậm đặc-Substrate Concentrate
01 lọ chứa 35 ml của 3,3’,5,5’- tetramethylbenzidine (TMB). Dung dịch ổn định với màu hồng. Lọ dung dịch sẽ bị hủy khi chuyển sang màu tía. Dung dịch Substrate ổn định ở nhiệt độ (2 - 8°C) hoặc từ 15-25°C trong 2 ngày. Pha theo tỉ lệ 1:1 giữa chất lên màu và dung dịch pha loãng chất lên màu.
11. Nước rửa-Wash Fluid
01 lọ nước rửa chứa 125 ml Glycine/Borate. Pha nước rửa với nước cất theo tỉ lệ 1:19. Với 1 lọ nước rửa (125ml) được pha với 2500 ml nước cất. Nước rửa dùng được trong 30 ngày nếu giữ ở nhiệt độ 18-30°C.
II.Qui trình xét nghiệm
Bước chuẩn bị:
                       Chuẩn bị hòan nguyên Conjugate
                        Chuẩn bị dung dịch rửa và chất lên màu.
                        Chuẩn bị số giếng cần thiết cho xét nghiệm.
Bước 1    Thêm 25 µl dung dịch pha loãng mẫu Sample Diluent vào tất cả các giếng.
Bước 2     Thêm 100 µl mẫu bệnh phẩm hoặc chứng âm chứng dương theo sơ đồ khay giếng.
(ví dụ như thêm 100 µl chứng âm Negative Controls vào giếng A1 đến C1, 100 µl chứng dương p24, anti-HIV-1 and HIV-2 Positive Controls vào giếng D1 đến F1)
Bước 3     Ủ khay giếng cho 60 phút ở nhiệt độ 37°C ± 1°C.
Bước 4      Rửa khay giếng 5 lần với thể tích nước rửa 500 µl cho mỗi giếng, ngâm giếng 30 giây cho mỗi chu trình rửa.
Bước 5    Thêm 100 µl chất cộng hợp Conjugate vào tất cả các giếng.
Bước 6     Ủ khay giếng cho 30 phút ở nhiệt độ 37°C ± 1°C.
Bước 7     Rửa khay giếng 5 lần với thể tích nước rửa 500 µl cho mỗi giếng, ngâm 30 giây cho mỗi chu trình rửa.
Bước 8    Thêm 100µl dung dịch lên màu Substrate vào tất cả các giếng.
Bước 9    Ủ khay giếng cho 30 phút tại nhiệt độ 37°C ± 1°C.
Bước 10   Thêm 50 µl dung dịch dừng phản ứng Stop Solution vào tất cả các giếng.
Bước 11   Đo mật độ quang của các giếng tại bước sóng 450nm/620nm hoặc 450nm/690nm.
III.Tính kết quả
Ngưỡng Cut-off
CO= NC + 0.15
IV.Điều kiện cho chứng âm và chứng dương
Chứng âm-Negative Control
Các giá trị của chứng âm nhỏ hơn 0.15
NC1<0.15
NC2<0.15
NC3<0.15
Ít nhất 2 giá trị của chứng âm phải thỏa mãn điều kiện:Valid(NCi)>=2
Chứng dương-Positive Control
Các giá trị của chứng dương lớn hơn hoặc bằng 0.8
PC Ag>= 0.8
PC Ag>= 0.8
PC p24>=0.8
PC>NC

V.Dịch kết quả
Mẫu không phản ứng
Mẫu được cho là âm tính nếu mật độ quang của mẫu nhỏ hơn giá trị ngưỡng Cut-off.
Mẫu phản ứng
Mẫu được cho là phản ứng nếu mật độ quang của mẫu lớn hơn hoặc bằng   giá trị ngưỡng Cut-off.

MỌI CHI TIẾT XIN VUI LÒNG LIÊN HỆ

CÔNG TY TNHH ĐT & PT KIM HƯNG

Tại TP.HCM: Số 383B Cộng Hòa, Phường 13, Q. Tân Bình, TPHCM.

ĐT: 0963889249/ 02838347789

Tại Hà Nội: Số 178 Tây Sơn, Phường Trung Liệt, Q. Đống Đa, HN

ĐT: 0912775249/ 02436320598

Website: [Only admins are allowed to see this link]

[You must be registered and logged in to see this image.]